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      實驗研究

      賴氨大黃酸與大黃酸對大鼠膽汁淤積性肝纖維化

      孔藝璇1,劉章心怡2,張榮花1,王琳1,衛敬澤 1,甄永占3,章廣玲1,3

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      【摘要】  【摘要】目的 探討賴氨大黃酸(rhein lysinat,RHL)和大黃酸對膽汁淤積性肝纖維化模型大鼠肝臟的保護作用,比較RHL與大黃酸對大鼠膽汁淤積性肝纖維化的療效。

      【關鍵字】  膽汁淤積,肝纖維化,賴氨大黃酸

      中圖分類號:文獻標識碼:文章編號:

      肝纖維化是指細胞外基質的合成和降解的不平衡導致肝臟纖維結締組織過度沉積,是多種原因引起的慢性肝病向肝硬化發展所經歷共有的病理改變和必經途徑[1]。目前研究表明,進行抗纖維化治療可以顯著降低肝纖維化程度,可以逆轉肝纖維化[2]。大黃酸(Rhein)是一種蒽醌類化合物,是大黃、何首烏、虎杖等傳統中藥的主要有效成分之一。研究表明大黃酸除具有抑制腫瘤細胞增殖[3-4]、抗炎[5]、抗菌及調節腎功能等功效,還具有保肝和抗肝纖維化的藥理作用[6],然而,水溶性較差的大黃酸,限制其進一步應用,為改善其水溶性,以賴氨酸作為溶劑對大黃酸的結構進行改造獲得水溶性較好的賴氨大黃酸。本研究采用膽總管結扎法建立大鼠肝纖維化模型,形成人為的肝外膽道梗阻,膽汁排泄障礙導致以膠原為主的細胞外基質成分合成增多,過多沉積在肝內竇周間隙形成肝纖維化[7]。此模型與CCL4和DMN等藥物所致化學損傷動物模型[8]相比有顯著差異,成模時間短且肝實質細胞無明顯壞死[9],對抗肝纖維化研究中具有重要意義。本研究旨在比較RHL和大黃酸防治BDL肝纖維化的作用。 1 材料與方法 1.1 動物、主要試劑和儀器:由天津實驗動物研究所提供SD大鼠,雄性,在22 ℃恒溫、65%~70%的相對濕度環境中飼養適應2 d后進行實驗。賴氨大黃酸自制,純度98%,相對分子質量:430,室溫儲存; ALT、AST、TBA、TBIL試劑盒,HE染色試劑盒,Masson 染色試劑盒,羥脯氨酸試劑盒購,RIPA裂解液,BCA蛋白濃度測定試劑盒,α-SMA抗體,GAPDH一抗抗體、羊抗兔二抗和羊抗小鼠二抗,免疫組化試劑盒;F6/10-8G型FLUKO 超細勻漿機,5810R低溫高速離心機,Gemini EM熒光讀板機,BX63全自動顯微鏡掃描系統,電泳轉印系統、凝膠成像系統,Rayto chemray 240全自動生化分析儀。

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